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Abb. 22: Analyse der Expression der PMCA1-mRNA in primären KDE-Zellen der Ratte nach 48-stündiger Stimulation mit DHT mittels semi-quantitativer-PCR. A: Beispiel einer PCR. Je 20 l jedes PCR-Produktes wurden auf einem 1 %igen, Ethidiumbromid-haltigen Agarosegel aufgetragen und die Bandenintesität mit dem Programm Scion Image bestimmt. B: Relative Bandenintensität. KDE-Zellen wurden mit verschiedenen Konzentrationen von DHT stimuliert. Aus den Zellen wurde jeweils RNA isoliert und in cDNA transkribiert. Mit GAPDH-Primern wurde die einzusetzende cDNA-Menge auf eine Schwankungsbreite von etwa 15 % abgeglichen. Der Versuch wurde in 2 unabhängigen Experimenten durchgeführt. Die PCR mit PMCA1spezifischen Primern wurde mit einer Zyklenzahl von 28 Zyklen durchgeführt, so dass die Produktmenge noch im exponentiellen Bereich lag. Für jede DHTKonzentration wurde eine PCR im 3fachen Ansatz durchgeführt. Die Fehlerbalken geben die Standardabweichung der unabhängigen Versuche wieder. N 2.
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